Metodologia de avaliação ecotoxicológica usando germinação de sementes em gel nutriente como meio de cultura

Resumo

Os estudos que visam desenvolver avaliações ecotoxicológicas devem realizar os ensaios, necessariamente, em um mesmo valor de pH. Ensaios para serem confiáveis devem ser realizados em meio de cultura com valores de pH idênticos, mesmo após adição do agente estressor. Este trabalho visou desenvolver uma técnica de ensaios ecotoxicológicos usando sementes como organismos teste, em meio de cultura empregando um gel como camada suporte. A preparação do gel desenvolveu-se por meio de uma Água de Diluição contendo concentrações otimizadas de nutrientes cujo valor de pH foi predefinido e fixado por solução tampão contendo parte dos nutrientes desejados. Para avaliações ecotoxicológicas foram adicionadas concentrações de agente estressor na preparação das Águas de Diluição (uma para cada concentração de estressor), acrescentando-se AGAR (17 g L-1) e aquecendo-se a 85°C para completa dissolução. Volumes da solução, ainda quente (20 mL), foram colocados em recipientes de vidro (250 mL) deixando esfriar até temperatura ambiente para formar uma camada de gel firme. Sobre o gel foram adicionadas 50 sementes lacrando-se o recipiente e colocando-o em local com luz ambiente (sem incidência direta da luz solar). A metodologia apresentou-se de simples operação, não requerendo manipulações no período de desenvolvimento dos embriões. Apresentou custo muito baixo (U$ 0,04), permitindo realizar avaliações eficazes dos ensaios ecotoxicológicos com análises seguras da germinação das sementes e estruturas essenciais das plântulas em valores de pH idênticos.